Ornithintest

toc Forfatter: Nanna Kaae, Rebecca Persson

Ornithin test

Aminosyre-decarboxylaser er enzymer, som fraspalter CO2 fra amonosyre under dannelse af basisk reagenser. Det dannes kun ved relativt lav pH og under tilstedeværelse af den pågældende aminosyre. Substratet indeholder derfor både aminosyre (ornithin) og glucose. Når glucosen forgæres falder pH og under de syre forhold, der derved opstår, danner bakterier decarboxylase, som spalter aminosyren, hvilket fører til at pH stiger igen. I det sure miljø dannes aminosyre-decarboxylaser, som spalter aminosyren i testboullionen til amin og CO2. Reaktionen kan registreres med indikatoren bromkresolpurpur og cresolrødt, som ved høj pH er violet. En negativ reaktion vil på grund af glucoseforgæringen medføre et lavt pH, og substratet vil derfor blive gult.

Glucoseforgæringen → syre → dannelse af aminosyre-decarboxylaser

Aminosyre → amin + CO2

Indikator gul → indikator violet

Ornithin testen udføres ved at man tager kolonimateriale i en testbouillion. Bouillonen stilles i varmeskab ved 35 grader. Efter 18-24 timer kan testboullions resultat aflæses. For at sikre de anaerobe forhold, er substratet dækket med steril paraffinolie, da der ellers vil ske en oxidering, hvilke vil medføre at andre reaktioner end de ønskede kan forhindre pH-stigningen.

Ornitin testen anvendes til diagnostik af enterobakterier, enterokokker, stafylokokker samt til adskillelse af Vibrio og Aeromonas.

Litteratur: Praktisk Mikrobiologi, Charlotte Birl Olsen, 2.a udgave, København 2012.